固相萃取装置是一种基于固相萃取技术的样品前处理设备,广泛应用于环境监测、食品安全、生物医药、化工与材料等领域,其核心功能是实现样品中目标化合物的分离、纯化与富集,为后续色谱分析(如HPLC、GC)提供高纯度样品,从而提升检测的准确性与灵敏度。
固相萃取装置的工作原理基于样品在固相(吸附剂)和液相(溶剂)之间的分配差异。通过调节流速,样品缓慢流过预先活化的SPE柱,目标化合物被吸附在填料上,而干扰物则随溶剂流出。随后,使用适当的洗脱液将目标化合物从吸附剂上洗脱下来,实现分离与富集。
1、装柱与准备
将合适的SPE小柱(根据目标物性质选择C18、HLB、离子交换柱等)插入装置的固定架中。
在小柱下方放置干净的收集管或试管,用于接收淋洗液和最终的洗脱液。
2、活化(Activation)
目的:使固定相充分润湿,去除柱内气泡,并将其从干燥状态转化为适合目标物吸附的状态。
操作:
用3-5 mL的洗脱强度较强的溶剂(如甲醇)冲洗小柱,打开真空泵,让溶剂流过。
紧接着用3-5 mL的与样品溶剂相似或稍弱的溶剂(如水或缓冲液)平衡小柱,使固定相适应样品的极性环境。
注意:在溶剂流干前进行下一步,避免小柱干裂。
3、上样(Loading)
目的:让样品溶液通过小柱,目标物被固定相吸附,而杂质被去除。
操作:
将预处理后的样品溶液(如经过过滤、调节pH的液体)缓慢加入小柱。
控制流速(通常为1-2滴/秒),确保目标物有足够时间与固定相结合。
收集流出液(通常弃去,除非目标物是水溶性杂质)。
4、淋洗(Washing)
目的:去除弱吸附的杂质,同时保留目标物。
操作:
用3-5 mL的弱溶剂(如水、5-10%甲醇水溶液)冲洗小柱。
淋洗液会带走极性杂质,而目标物仍留在柱上。
完q抽干小柱,为洗脱做准备。
5、洗脱(Elution)
目的:用强溶剂将目标物从固定相上解吸下来,实现富集。
操作:
用1-3 mL的强溶剂(如甲醇、乙腈、或含酸/碱的有机溶剂)分2-3次冲洗小柱。
打开真空泵,收集全部洗脱液于干净试管中。
可将洗脱液在氮吹仪下浓缩至近干,再用流动相定容,供后续分析(如HPLC、GC-MS)。
